問:**近在做酵母雙雜交,有些營養缺陷培養基要單獨加氨基酸,不知道這些氨基酸配成母液以后能不能高溫高壓滅菌啊?請各位高手指教,謝謝!
答:一般來說,在配制培養基過程中,在高溫高壓過程中易配破壞的成分如葡萄糖,氨基酸,抗生素等,多采用0.22um的濾膜過濾除菌。所以,建議樓主**好,過濾除菌后單獨加入。
問:基酸不能高壓滅菌嗎?可是在測定蛋白質中氨基酸含量的時候,酸解的條件可是110℃濃鹽酸的條件下啊,這個反應里的氨基酸可是可以跑HPLC的,而且氨基酸也基本不存在空間構像問題。我在有些文獻中見過氨基酸用121℃滅菌15min的。不知大家有何意見?
答:你的培養基中含有葡萄糖等具有醛基的物質,氨基酸與葡萄糖等在高溫下發生麥拉德反應生成羰氨化合物降低了氨基酸的含量,另外這些物質使培養基顏色加深,甚**對微生物產生毒害作用。一般來說將氨基酸過濾除菌,在培養基冷卻到五六十度的時候加入即可。
答:請參考G標,可以測定高溫后的含量變化,其實就是個驗證實驗,當然樣品必須是單獨滅菌的了。Good luck!