(一)干熱滅菌 【原理】
高溫對細菌有明顯的致死作用,主要機理是凝固菌體蛋白質(zhì),也可能與細菌DNA單螺旋斷裂、細菌膜功能受損及菌體內(nèi)電解質(zhì)濃縮有關(guān)。干烤箱為常用的干熱
滅菌器,其殺菌作用是通過脫水干燥和大分子變性完成的。 【構(gòu)造】
干烤箱是中間夾著石棉的雙層金屬制成的方形或長方形箱,箱底裝有熱源,箱內(nèi)有數(shù)層金屬架,并附有溫度計和自動溫度調(diào)節(jié)器等裝置。把待滅菌的物件均勻地放入恒溫干燥箱,加熱**160℃~170℃維持2小時即可達滅菌目的。 【使用方法及注意事項】
1.將包扎好的待滅物品(培養(yǎng)皿、吸管器等)放于箱內(nèi),注意不要擺得太擠,以免妨礙氣流流通。
2.關(guān)門,插上電源插頭(常為220伏),撥動開關(guān),旋動恒溫調(diào)節(jié)器,**紅燈亮。 3.待溫度上升160℃~170℃時,借恒溫調(diào)節(jié)器的自動控制,保持此溫度2小時。 4.滅菌后停止加熱,待溫度下降**40℃以下方可開門取物,在這之前切勿自行打開箱門,否則其內(nèi)物品(如玻璃器皿等)會因溫度驟然下降而爆裂。 【應(yīng)用】
干熱滅菌主要用于要求干燥的、耐高溫的物品滅菌,如玻璃器材、瓷器、凡士林、液體石蠟、藥粉等的滅菌。一般不耐高溫的、含有水份的物質(zhì),不能用這種方法滅菌。
(二)濕熱滅菌 【原理】
高溫對細菌有明顯的致死作用,主要機理是凝固菌體蛋白質(zhì),也可能與細菌DNA單螺旋斷裂、細菌膜功能受損及菌體內(nèi)電解質(zhì)濃縮有關(guān)。濕熱滅菌所需溫度較低,時間較短(表3-2)。特別是高壓蒸氣滅菌,因增加壓力而提高溫度,滅菌效果**佳。其主要優(yōu)點是:①溫度較高,滅菌所需時間較短;②蒸氣穿透力強;③蒸氣冷凝時釋放汽化熱,能迅速提高物品的溫度;④物品不過分潮濕。 表3-2 熱力消毒滅菌法比較
方法 溫度(℃) 時間(min)
滅菌器 適用物品 焚燒 >500 瞬時 廢棄物品、動物尸體滅菌
干烤 160~170 120 干熱
滅菌器(干烤箱) 玻璃器材、瓷器等滅菌 巴氏消毒法 61.1~62.8 71.7 30
15-30s 牛奶、酒類等消毒
煮沸消毒法 100 5 食具、刀剪、注射器等消毒
流通蒸氣消毒法 100 15~30 Arnold流通蒸氣滅菌器 食具等消毒
間歇滅菌法 100 30 流通蒸氣滅菌器(重復(fù)3次) 不耐高溫的含糖、牛奶等培養(yǎng)基 高壓蒸氣滅菌法 121 15~30 高壓蒸氣滅菌器 耐高溫、高壓及不怕潮濕的物品 高壓蒸氣滅菌器是目前應(yīng)用**廣泛、滅菌效果**好的滅菌器具,其種類有手提式、直立式、橫臥式等。它們的構(gòu)造及滅菌原理基本相同。高壓蒸氣滅菌方法的原理是水在大氣中100℃左右沸騰,水蒸氣壓力增加,沸騰時溫度將隨之增加,因此,在密閉的高壓蒸氣滅菌器內(nèi),當壓力表指示蒸氣壓力增加到15磅(1.05kg/cm)時,溫度則相當于121.3℃,在這種溫度下20min即可完全殺死細菌的繁殖體及芽胞。 【構(gòu)造】
高壓蒸汽滅菌器有各種形式及規(guī)格。下面以常用的高壓蒸汽
滅菌鍋為例進行介紹。高壓蒸汽
滅菌鍋是一個密閉的耐高溫和耐高壓的雙層金屬圓筒,兩層之間盛水。
①外鍋:供裝水產(chǎn)生蒸汽之用。堅厚,其上方或前方有金屬厚蓋,蓋有螺栓,借以緊閉蓋門,使蒸汽不能外溢。加熱后,滅菌器內(nèi)蒸汽壓力升高,溫度也隨之升高,壓力越大,溫度越高。 外鍋壁上還裝有排氣閥、溫度計、壓力表及安全閥。排氣閥用于排出空氣;壓力表:以表示鍋內(nèi)壓力及溫度(公制壓力單位為公斤/cm2、英制壓力單位磅/英寸2、溫度單位℃);安全閥又稱保險閥,利用可調(diào)彈簧控制活塞,超過定額壓力即自行放汽減壓,以保證在滅菌工作中的安全。
②內(nèi)鍋:為放置滅菌物的空間。
【使用方法及注意事項】
1.使用前的準備:滅菌器內(nèi)清洗干凈,檢查進氣閥及排氣閥是否靈活有效,并加入適量水。 2.裝放滅菌物:將待滅菌的物品放入滅菌器內(nèi),注意不要放得太擠,以免影響蒸汽的流通和滅菌效果。然后加蓋旋緊螺旋,密封。
3.預(yù)熱及排氣:加熱升溫使水沸騰,并由小**大打開排氣管(排氣閥),排除冷空氣,繼續(xù)加熱升溫,再關(guān)閉排氣管(閥)。
4.升壓保溫:讓溫度隨蒸汽壓力增高而上升待壓力逐漸上升,待蒸汽壓力升**所需壓力(一般為103.43kPa,溫度則相當于121.3℃)時,控制熱源,維持所需時間,持續(xù)15~20min即可達到滅菌目的。
5.降壓開蓋取物:保壓到規(guī)定時間之后,就停止加熱,緩緩排氣,待其壓力下降**零時,方可開蓋取物。 6.注意事項
⑴此法滅菌是否徹底的一個關(guān)鍵是壓力上升之前,必須先把蒸汽鍋內(nèi)的冷空氣完全驅(qū)盡,否則,即使壓力表已指到103.43kPa,而鍋內(nèi)溫度則只有100℃,這樣芽孢則不能被殺死,造成滅菌不徹底,所以必須進行排氣。
⑵降壓一般通過自行冷卻。如果時間來不及,可以稍開排氣閥降壓,但排氣閥不能開得太大,排氣不能過急,否則滅菌器內(nèi)驟然降壓,滅菌物內(nèi)的液體會突然沸騰,將棉塞沖濕,甚**外流。另外,降壓時壓力表上讀數(shù)雖已降**“0”時,滅菌物內(nèi)溫度有時還會在100℃以上,如果開鍋太快還有沸騰的可能,所以**好在降壓后再稍停一會,滅菌物溫度下降后再出鍋較妥當。滅菌物滅菌后仍處于高溫時,容器內(nèi)呈真空狀,降溫過程中外部空氣要重新進入容器。一般叫“回氣”,降溫過快,回氣就急,如棉塞不嚴密,空氣中雜菌就會重新進入滅菌物使其污染,這往往造成高壓蒸汽滅菌的失敗。因而降壓開蓋取物不宜過急。 【應(yīng)用】
高壓蒸汽滅菌可用于耐高溫、高壓及不怕潮濕的物品,如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、紗布、敷料、手術(shù)器械、玻璃器材、隔離衣等的滅菌。